國家衛(wèi)生健康委員會 國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》（GB 2760-2024）等47項食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)和6項修改單的公告（2024年 第1號）其中包括GB 5009.299-2024《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中乳鐵蛋白的測定》，該標(biāo)準(zhǔn)于2024年8月8日正式實施。

乳鐵蛋白

乳鐵蛋白是一種鐵結(jié)合蛋白，屬于轉(zhuǎn)鐵蛋白家族中的一員。它是一種具有多種生理活性的天然蛋白質(zhì)、參與調(diào)節(jié)免疫功能、抗微生物、調(diào)節(jié)鐵吸收、促進(jìn)腸道細(xì)胞增值分化等功能。乳鐵蛋白主要存在于母乳，也可以從乳制品、肉、蛋及強(qiáng)化乳鐵蛋白食品中攝取。

萊奧為即將實施的標(biāo)準(zhǔn)《GB 5009.299-2024》，提供最佳的前處理解決方案。

Leowlab Purifier A48

48位正壓固相萃取儀

儀器設(shè)備：

前處理流程圖：

實驗方法概要：

1、稱取液態(tài)樣品5g/固體試樣1~5g與燒杯中，加入溫?zé)幔ú坏贸^50℃，乳鐵蛋白溫度過高容易失去活性，導(dǎo)致變性）磷酸鹽緩沖液Ⅱ，溶解，液體樣品轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶并定容（固體樣品轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶并定容），轉(zhuǎn)入離心管低溫條件下離心（固體樣品取40mL離心），取樣液待凈化；

2、活化柱子，準(zhǔn)確移取10mL樣液到Leowlab Purifier A48正壓固相萃取儀，通過調(diào)節(jié)低壓閥，控制流速在1mL/min~3mL/min，待樣液滴完，用磷酸鹽緩沖液Ⅱ淋洗，下接10ml玻璃管/15ml離心管，用5mL磷酸鹽緩沖液Ⅰ洗脫，再用磷酸鹽緩沖液定容至5mL，過水膜，待上機(jī)。

磷酸鹽緩沖液Ⅰ：稱取 7.1g磷酸氫二鈉、58.4 g氯化鈉,加 900 ml 水溶解,用磷酸調(diào) pH 至 8.0士 0.2,加水定容至 1000 m,臨用現(xiàn)配。

磷酸鹽緩沖液Ⅱ：稱取 28.4 g磷酸氫二鈉,加 900 mL水溶解,用磷酸調(diào) pH 至 7.5±0.2,加水定容至 1 000 m,臨用現(xiàn)配。

實驗注意事項：

1、磷酸鹽緩沖液需要現(xiàn)配現(xiàn)用。

2、提取時的緩沖液盡量使用溫?zé)?，溫度不易過高，否則導(dǎo)致乳鐵蛋白失活。

3、過柱時，采用Leowlab Purifier A48正壓固相萃取儀過柱時，盡量低壓慢慢調(diào)高，速度控制在1mL/min~3mL/min，不宜過快，否則會導(dǎo)致目標(biāo)物流失，回收率偏低；

方案特點：

1、固相萃取時，相比負(fù)壓， Leowlab Purifier A48正壓固相萃取儀不需要一個個調(diào)節(jié)流速按鈕，省去繁瑣的調(diào)節(jié)時間，以及更好保證均勻性，從而獲得很好的回收率。

2、負(fù)壓萃取，因手動調(diào)節(jié)流速按鈕，導(dǎo)致流速有一定的快慢偏差，流速過快，柱保留低，回收率低；流速過慢，影響處理時間，降低效率。Leowlab Purifier A48正壓固相萃取儀能很好的把控流速快慢。

3、若樣品量大，選擇48位正壓固相萃取，能大大節(jié)省過柱的時間。